我們?nèi)粘Ｉ钪兴纳囵B(yǎng)箱供于多個領域應用，其中使用的便是多管發(fā)酵法和濾膜法，但你知道在使用過程中要注意哪些事項嗎？現(xiàn)在就來講解一下該注意的要點。
培養(yǎng)溫度的要求
總菌群中的細菌除生活在腸道中外，在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在，但此等在自然環(huán)境中生活的菌群培養(yǎng)的最合適溫度為25℃左右，如在37℃培養(yǎng)則仍可生長，但如將生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃，則不再生長，而直接來自糞便的菌群細菌，習慣于37℃左右生長，如將生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此，可用提生化培養(yǎng)箱高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的菌群與糞便中的菌群區(qū)分，兩種方法也都基于此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時，生化培養(yǎng)箱箱內(nèi)溫度一定要達到所要求的溫度(44.5±0.5℃)時，方可放入。如用恒溫水浴箱時，其水面要高于接種物面，放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
加氯水樣的處理
經(jīng)氯處理消毒過的水樣，水中含有一定量的余氯，使菌群處于受損或受抑制狀態(tài)，在采集水樣時應提前在生化培養(yǎng)箱采樣瓶中加硫代硫酸鈉，硫代硫酸鈉可以脫氯，使受損的細菌得以復蘇與修復，從而避免出現(xiàn)計數(shù)結果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細菌其抑制作用尤為明顯，所以抽濾時應對水樣進行大量無菌水稀釋，以減少余氯的殘留。
樣品的保存
生化培養(yǎng)箱采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋，用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好，置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h，或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要，如保存不當可使樣品中的菌群細菌死亡或在一定條件下再生長，這些都將影響檢測結果的準確性。檢測室接到水樣后，應立即檢測，如因故不能檢測時，應立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時內(nèi)檢測。
培養(yǎng)物質(zhì)的制備與保存
1、多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管中后，應將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中，在115℃滅菌20min(注意：這個溫度也應控制好，既達到滅菌的作用，還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失)，然后貯存于冰箱或暗處備用。
2、濾膜法所采用的m-fc培養(yǎng)基多使用外購的成品，培養(yǎng)基中苯胺藍的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色，因此，無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前，先接種典型糞菌，以觀察對比菌落的顏色，來鑒定其穩(wěn)定性。
結果統(tǒng)計
1、多管發(fā)酵法的結果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽性結果的數(shù)目，從mpn表中查得相應的mpn指數(shù)，來計算每升水中糞菌群細菌的mpn值。mpn是“most probable number”的縮寫，它是根據(jù)統(tǒng)計學理論，估計水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法，所以準確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽性數(shù)是非常重要的，否則將導致較大偏差。
2、濾膜法的結果是計數(shù)濾膜上呈藍或藍綠色的菌落，來計算出每升水樣中的糞菌群數(shù)。所以為便于計數(shù)，減少誤差，理想的水樣體積是一片濾膜上生長20-60個糞菌群菌落。
目前最常用到生化培養(yǎng)箱的是多管發(fā)酵法與濾膜法，掌握了解好這些注意要點可以讓我們在使用過程中減少不必要的錯誤。
生化培養(yǎng)箱：http://www.kentonchina.com/shpyx/20160512/27.html