| 人類風(fēng)濕因子試劑盒RFelisa試劑盒侖昌碩生物 |
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侖昌碩生物 人類風(fēng)濕因子(RF)elisa試劑盒?? ? ? ??? ? ?? ?1. 包被抗原:用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1~10微克/孔,每孔加200微升,37℃溫育1小時(shí)后,4℃冰箱放置16~18小時(shí)。 ?2. 洗滌:倒盡板孔中液體,加滿洗滌液,靜放三分鐘,反復(fù)三次,將反應(yīng)板顛倒在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡。 3. 加封閉液200微升,37℃放置一小時(shí)。 4. 洗滌同2。 5. 加被檢血清:用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,,每孔200微升。同時(shí)作稀釋液對照。37℃放置2小時(shí)。 6. 洗滌同2。 7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時(shí)。 8. 洗滌同2。 9. 加底物:鄰*二胺溶液加200ml,室溫暗處10--15分鐘。 10. 加終止液:每孔50微升。 11. 觀察結(jié)果:用酶聯(lián)免疫檢測儀記錄450nm讀數(shù)。
侖昌碩生物 人類風(fēng)濕因子(RF)elisa試劑盒?? ?? ? ? ? ? 目的對研制的人血清微量sCR1蛋白雙抗體夾心ELISA試劑盒的重復(fù)性,穩(wěn)定性進(jìn)行評價(jià),并了解其實(shí)際應(yīng)用效果.方法選取中,晚期肝硬化患者50例和健康體檢者50例分別作為肝病組和正常對照組,以鼠抗人CD35單克隆抗體,兔抗人sCR1多克隆抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG為包被抗體,夾心抗體和檢測抗體,以純化后的重組人sCR1蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品,建立人血清微量sCR1蛋白雙抗體夾心ELISA試劑盒,進(jìn)行試劑盒重復(fù)性和穩(wěn)定性檢驗(yàn),并應(yīng)用該試劑盒檢測兩組血清sCR1蛋白水平.結(jié)果雙抗體夾心ELISA法檢測人血清微量sCR1蛋白的線性范圍是15.60~250.00ng/mL;血清sCR1蛋白水平對吸光度值的回歸方程為Y=112.10 X2 18.21 X 1.694(r2=0.998);重復(fù)性檢測中,高,低水平標(biāo)準(zhǔn)品檢測值的批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為6.20,7.40,批間RSD分別為6.70和7.90;試劑盒穩(wěn)定性檢測中,RSD均不大于0.01;肝病組血清sCR1表達(dá)水平顯著高于正常對照組(P0.01).結(jié)論人血清微量sCR1蛋白雙抗體夾心ELISA試劑盒線性范圍廣,重復(fù)性好,易于保存,適合于臨床和科研檢測工作.
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