| 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) |
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5.1透射率檢測(cè) 將固體測(cè)試架放入測(cè)試倉(cāng),在測(cè)試樣的位置放置測(cè)試的樣品,保持參比樣上為空。點(diǎn)擊菜單欄“ ”,在彈出的項(xiàng)目中選擇”第一層透射率”或”第二層透射率”,儀器自動(dòng)開(kāi)始透射率測(cè)試. 5.2反射率檢測(cè) 取出測(cè)試倉(cāng)中的固體測(cè)試架和樣品,將鏡片反射測(cè)試架放入測(cè)試倉(cāng)中,放置時(shí)請(qǐng)確定測(cè)試架與參比架均在正確的位置.將參比白板置于參比架上,測(cè)試件置于測(cè)試架上。在彈出的項(xiàng)目中選擇相應(yīng)的反射率測(cè)試項(xiàng)目(如正(反)反射率)并點(diǎn)擊“確定”,開(kāi)始正(反)反射率的測(cè)試.正(反)反射率測(cè)試完成后,請(qǐng)將測(cè)試件調(diào)換測(cè)試面,開(kāi)始反(正)反射率測(cè)試. 5.3多層玻離檢測(cè) 如試件為多層中空玻璃,請(qǐng)?jiān)趨?shù)設(shè)置中正確設(shè)置相對(duì)應(yīng)的參數(shù).如測(cè)試總層數(shù),各層之間的間距等.設(shè)置完成后,即可進(jìn)行測(cè)試.多層玻測(cè)的測(cè)試與單層玻璃的測(cè)試步驟相同,各層之間的測(cè)試及分層項(xiàng)目不分先后順序.可以逐層測(cè)試,可也以先完成所有層的透射率測(cè)試后,再完成所 有層的反射率測(cè)試.當(dāng)所有的測(cè)試項(xiàng)目完成后,程序提示測(cè)試完成后,所有數(shù)據(jù)將自動(dòng)保存。在檢測(cè)過(guò)程中,可以點(diǎn)擊菜單欄上“ ”停止測(cè)試,但所有的測(cè)試數(shù)據(jù)將不會(huì)自動(dòng)保存。注意:如果矯正數(shù)據(jù)不正確或者未進(jìn)行矯正操作,程序會(huì)提示重新進(jìn)行矯正操作
系數(shù)倍率法 (1)系數(shù)倍率法儀器原理(見(jiàn)圖 12) 雙波長(zhǎng)分光光度法中用等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)消除干擾,是測(cè)定兩組分體系的一個(gè)好方法。但是在干擾組分的吸收光譜中,找不出等吸收點(diǎn)時(shí),就不能用此法消除干擾。系數(shù)倍率法克服等吸收波長(zhǎng)的局限性。系數(shù)倍率法在雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)中增加一個(gè)系數(shù)倍率器,獲得差示信號(hào)與干擾組分含量無(wú)關(guān)。 ⊿A=Aλ2-K1Aλ1=kC式中⊿A――差示吸光度值; Aλ2――樣品溶液在測(cè)量波長(zhǎng) λ2 處的總吸光度值; Aλ1――樣品溶液在參比波長(zhǎng)處的總吸光度值; K1 ――校正系數(shù),通過(guò) K1 校正扣除了干擾組分吸光度; K ――標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率; C ――樣品溶液待測(cè)組分濃度。 按著上述原理,可用下式求 K1 系數(shù)。
因此,只要測(cè)出干擾組分在 λ2 和 λ1 處的吸光度值,便求解 K1,實(shí)際上它是對(duì)干擾組分的校正系數(shù)。K1 與干擾組分濃度無(wú)關(guān),只與 λ1 位置有關(guān)。 1-光源; 2—單色器; 3—切光器; 4—吸收池; 5—光電倍增管 6—初級(jí)放大器; 7—同步放大器; 8—對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器; 9—系數(shù)倍增器; 10—差算電路; 11—數(shù)字電壓表(2)舉例 ①食品紅 2 號(hào)(R2)和山梨酸的測(cè)定 由圖 13 可見(jiàn),為測(cè)定 R2 和山梨酸混合樣品兩組分,可選山梨酸的 λmax=262 nm 為測(cè)定波長(zhǎng) λ2,以 320 nm 為參比波長(zhǎng)(λ1)測(cè)定山梨酸含量(Aλ2> Aλ1,按 2-16 式求 K)。而以 262 nm 和 240 nm 為組合波長(zhǎng)測(cè)定食品紅 2 號(hào)(R2)。②復(fù)方黃連素注射液中甲氧芐氨嘧啶(TMP)含量的系數(shù)倍率法測(cè)定 由圖 14 可見(jiàn),
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