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廠家直供植物精氨酸脫羧酶(ADC)ELISA Kit
廠家直供植物精氨酸脫羧酶(ADC)ELISA Kit 價(jià)格:198000  元(人民幣) 產(chǎn)地:本地
最少起訂量:1 發(fā)貨地:本地至全國(guó)
上架時(shí)間:2019-11-08 11:37:14 瀏覽量:100
上海朗頓生物科技有限公司  
經(jīng)營(yíng)模式:其他 公司類型:生產(chǎn)加工
所屬行業(yè):綜合 主要客戶:全國(guó)
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聯(lián)系方式

聯(lián)系人:廖凱文 () 手機(jī):13045656500
電話: 傳真:
郵箱: 地址:上海市楊浦區(qū)大連路1548號(hào)

詳細(xì)介紹


植物精氨酸脫羧酶(ADC)酶聯(lián)免疫檢測(cè)
試劑盒使用說(shuō)明書

使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。
本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于生物素雙抗體夾心技術(shù)原理,來(lái)檢測(cè)植物精氨酸脫羧酶(ADC)),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。


用??? 途: 用于植物相關(guān)液體樣本中精氨酸脫羧酶(ADC)的測(cè)定。

工作原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中植物精氨酸脫羧酶(ADC)的水平。
向預(yù)先包被了植物精氨酸脫羧酶(ADC)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入精氨酸脫羧酶(ADC),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗ADC抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。
顏色的深淺與樣品中植物精氨酸脫羧酶(ADC)的濃度呈正相關(guān)。

試劑盒組成
1?標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml)?0.5ml?7?顯色劑A液?6ml
2?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?3ml?8?顯色劑B液?6ml
3?酶標(biāo)包被板?12孔×8條?9?終止液?6ml
4?鏈霉親和素-HRP?6ml?10?說(shuō)明書?1份
5?30倍濃縮洗滌液?20ml?11?封板膜?2張
6?生物素標(biāo)記的抗- ADC抗體?1ml?12?密封袋?1個(gè)
需要而未提供的試劑和器材
1.?37℃恒溫箱。

2.?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3.?精密移液器及一次性吸頭
4.?蒸餾水,
5.?一次性試管
6.?吸水紙
注意事項(xiàng)
1.?從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.?各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。

3.?嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

4.?為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

5.?不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
不同批號(hào)的試劑不要混用。
保質(zhì)前使用。

6.?底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。

洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。
根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。


標(biāo)本要求
1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作程序
1.?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶請(qǐng)按照說(shuō)明自行在小試管中倍比稀釋):
24ng/ml?(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)?120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12ng/ml?(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)?120μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ng/ml?(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)?120μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3ng/ml?(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)?120μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ng/ml?(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)?120μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.?根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。
每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。
每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3.?加樣:1)空白孔:空白對(duì)照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗ADC抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,鏈霉素-HRP50μl(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)待測(cè)樣品孔:加入樣本40μl,然后各加入抗- ADC抗體10μl、鏈酶親和素-HRP50μl,蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育60分鐘。

4.?配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.?洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.?顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。

7.?終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

8.?測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。
測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。
也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。

操作程序總結(jié):
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,生物素標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘

洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘

加入終止液

10分鐘之內(nèi)讀OD值

計(jì)算

檢測(cè)范圍:0.1ng/ml→40ng/ml。

規(guī)格:??? 96T/盒
保存:??? 2-8℃
有效期:? 6個(gè)月(2-8℃)。


?
植物精氨酸脫羧酶,ADC,ELISA

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