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色譜柱引起的色譜峰問題

1、鬼峰或Carryover交叉污染？

系統(tǒng)污染導(dǎo)致大多數(shù)的鬼峰或Carryover交叉污染問題。如果額外的鬼峰峰寬與樣品色譜峰相近(保留時(shí)間也相近)，污染物有可能是與樣品同時(shí)進(jìn)入色譜柱。額外組分的可能來源是進(jìn)樣器(例污染物)或樣品本身。溶劑、樣品瓶、瓶蓋和進(jìn)樣針中的雜質(zhì)也是可能的其他來源。分別進(jìn)樣分析樣品和空白溶劑可以找到污染物來源。如果鬼峰比樣品色譜峰寬許多，則早在樣品進(jìn)入色譜柱之前，污染物已經(jīng)存在于色譜柱中。上一次樣品運(yùn)行被中斷后，上述組份殘留在色譜柱中。在樣品運(yùn)行的后期流出色譜柱，且峰形較寬。有時(shí)，多次進(jìn)樣疊加后形成多個(gè)鬼峰或以駝峰形式流出，并伴隨有基線漂移。

升高終溫或延長(zhǎng)程序升溫時(shí)間可減少或消除鬼峰。另外，每次或幾次樣品分析后，進(jìn)行一次短時(shí)間的色譜柱烘烤可以消除色譜柱上的強(qiáng)保留化合物，避免導(dǎo)致不良后果。進(jìn)行冷凝測(cè)試可判定是否是由于進(jìn)樣口被污染而導(dǎo)Carryover交叉污染或鬼峰。

2、為什么走空白時(shí)會(huì)出樣品峰?

這與樣品制備或系統(tǒng)潔凈程度有關(guān)。更換樣品制備，空白制備以及洗針瓶中的溶劑，更換新的進(jìn)樣針和隔墊，取下分流口管線進(jìn)行清洗，不進(jìn)樣運(yùn)行空白溫度程序，觀察是否色譜峰是由于加熱色譜柱而導(dǎo)致。

3、標(biāo)樣和樣品峰隨保留時(shí)間增加而峰形變寬，是否正常？

如果保留時(shí)間沒有明顯變化但是色譜峰變寬、拖尾，這表明系統(tǒng)中存在活性點(diǎn)。如果變寬的色譜峰是對(duì)稱的， 則表明正常的色譜柱柱效下降；如果色譜峰前伸， 則表明色譜柱過載。

4、基線噪音過高？

5、基線不穩(wěn)或紊亂？

6、色譜峰拖尾？ 

進(jìn)樣口或色譜柱被污染， 或色譜柱切口不平整。將進(jìn)樣口冷卻下來，關(guān)掉氣路，更換或清潔進(jìn)樣口部件，包括進(jìn)樣襯管和鍍金密封墊。取出色譜柱，將色譜柱柱頭部分切除一段消除殘留的非揮發(fā)性組份，隔墊材料和石墨墊碎屑。切除的柱長(zhǎng)可按實(shí)際需要為1英尺到1米，甚至更長(zhǎng)。使用正確的色譜柱切割工具是關(guān)鍵，切割不平整，樣品會(huì)發(fā)生吸附。在重新安裝任何部件之前必須確保徹底清洗進(jìn)樣口，推薦使用溶劑清洗分流口管線。

使用不分流模式進(jìn)行分析時(shí)，太長(zhǎng)的不分流時(shí)間會(huì)導(dǎo)致拖尾，常用設(shè)定的時(shí)間0.5至1分鐘。

死體積也會(huì)導(dǎo)致拖尾的發(fā)生，確保色譜柱安裝正確地于檢測(cè)器和進(jìn)樣口中。

如果必須保證使用相同的色譜柱柱長(zhǎng)，則可考慮使用一段未涂敷的保留間隙柱 (色譜柱前的預(yù)柱)。保留間隙柱可以切除或更換，而不損失柱效，并且可有效延長(zhǎng)色譜柱壽命。使用保留間隙柱時(shí)必須確保保留間隙柱和分析色譜柱之間的連接部分不漏氣和不吸附樣品。

7、裂分峰？

8、色譜峰大小發(fā)生變化？

9、保留時(shí)間變化？

10、分辨率損失？

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